| · 完整的BCR分析：支持分析重链(IgG, IgM, IgA, IgD, IgE) 和轻链 (IgK, IgL) · 灵活的样本起始条件：支持10 ng - 1 μg 小鼠脾脏、骨髓、淋巴结、全血以及PBMC来源的高质量RNA起始（RIN>7） · 简化的操作流程：组分中的重、轻免疫球蛋白链引物以及酶均是预混形式 · 更可靠测序数据：SMARTer Oligo上引入UMI，用于校正测序错误和PCR偏差 · 灵活的测序平台选择：可自由选择V(D)J全长分析，或只分析CDR3 |
| ■ 产品说明 |
| SMART-Seq Mouse BCR (with UMIs)是一款小鼠BCR NGS文库构建试剂盒。该试剂盒整合SMART（Switching Mechanism at 5' end of RNA Template）全长cDNA合成技术与5’RACE技术，可捕获重链(IgA/D/E/G/M) 和轻链 (IgK/L)基因完整的V(D)J可变区，用于后续NGS分析。 该试剂盒支持不同起始量的RNA（RIN>7）起始，均可获得高品质的测序文库。比如小鼠脾脏、骨髓或者外周血单核细胞（PBMC）纯化的10 ng-1 μg的总RNA，也支持从小鼠血液或者淋巴结中提取的RNA样本。 该试剂盒中的重、轻免疫球蛋白链引物以及酶均是预混形式，减少了试剂组分数量和操作步骤。另外该试剂盒还包括特别的分子条形码（UMI），可以消除PCR错误或duplication以及测序偏向，从而确保获得更准确和可靠的结果。此外，搭配使用的双端特殊index（UDI，Unique Dual Index），可以提供完整的从样品到文库构建的实验体验。 该试剂盒所建文库支持更多样的测序平台。既支持Miseq平台（分析V(D)J全长信息），也支持其它Illumina平台（分析CDR3区），节约成本。 |
| ■ 应用 |
| · 用于分析组织和循环系统中的B细胞的克隆组织和多样性，了解它们如何影响B细胞的分化途径和功能。 · 发现具有高亲和力的BCR，以便更好地为疫苗接种或传染病治疗提供指导。 · 追踪抗原特异性B细胞在HIV以及其他疾病的小鼠模型中过继转移后的变化和迁移。 · 检查BCR序列，以研究针对新表位的自体抗体随时间的变化，以及这些变化如何与严重的自身免疫疾病相关联，如狼疮。 |
| ■ 建库原理 |
Panel A. 检测所有重链(IgA/D/G/M，除了IgE，因为它在正常小鼠样本中的表达量非常低)和轻链 (IgK/L)。结果显示，随着起始量的增加，检测到的克隆型数量也随之增加。
Panel B. 结果显示，重链和轻链的克隆型数量随着起始量的增加也随之增加。
