| RetroNectin |
| RetroNectin技术可以显著提高逆转录病毒的转染效率，这一发现克服了向造血干细胞中导入基因的困难。现在，RetroNectin技术已成为使用逆转录病毒进行转染操作的常规选择，其操作流程大致如下： |
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1. 注射用水或灭菌蒸馏水充分溶解RetroNectin，调节浓度至1mg/ml。 2. 0.22 μm滤膜过滤RetroNectin溶液，分装后-20 ℃保存。 3. 用缓冲液将RetroNectin溶液稀释至20～100 μg/ml。 4. 将RetroNectin稀释液加入24孔板，每孔0.5 ml (建议用PBS缓冲液稀释RetroNectin后包被Non-Tissue Cluture Treated plate。 5. 室温放置4小时或4 ℃，避光，过夜。 6. 吸出RetroNectin溶液，每孔加入PBS终止液0.5 ml。 7. 室温放置30分钟。 8. 加入适量PBS清洗孔板。 9. 吸出清洗液，得到RetroNectin包被的孔板 (如果暂不使用，可以在孔中加入适量PBS，用胶膜将平板盖密封，避免RetroNectin干燥，可于4 ℃保存4周。使用前将PBS吸出) 。 10. 逆转录病毒保存液 (-80 ℃) 于37 ℃水浴融解。 11. 将病毒液加入包被后的24孔板，每孔300 μl。 12. 32 ℃放置4小时。 13. 吸出病毒保存液。 14. 每孔加入待转染的细胞悬液400 μl (通常细胞浓度为1 × 105/ml) 。 |
页面更新：2017-12-01 09:30:55
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