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| ■ 制品内容 (25 μl反应×100 次量) |
| Retrovirus Primer Mix for Provirus, Human (10 pmol/μl each) |
50 μl |
| Retrovirus Probe for Provirus, Human (10 pmol/μl)* |
50 μl |
| hIFNγ Primer Mix for Provirus (10 pmol/μl each) |
50 μl |
| hIFNγ Probe for Provirus (10 pmol/μl)* |
50 μl |
| DNA Control Template for Provirus, Human (200 pg/μl) |
15 μl |
| EASY Dilution (for Real Time PCR) |
1 ml × 4 |
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| * 荧光标记探针应避光保存。 |
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| ■ 制品说明 |
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本制品是利用Real Time PCR方法对以MLV(murine leulcemia Virus: 鼠白血病病毒) 为基础的逆转录病毒 (Retrovirus) 载体向人体正常细胞中导入基因时，测定前病毒拷贝数的试剂盒。前病毒 (Provirus) 是指逆转录病毒基因组整合至宿主DNA中的状态，此状态称为前病毒。
本制品与CycleavePCR Core Kit (Code No.: CY501) 组合使用，通过测定导入基因的人体正常细胞基因组DNA来测定前病毒拷贝数。另外，本制品扩增的区域为MLV的包装信号区，因此，可以测定大部分以MLV为基础的逆转录病毒载体导入人体正常细胞后的前病毒拷贝数。
传统的前病毒测定方法是把导入基因的宿主细胞克隆后，通过Southern blotting方法进行测定，计算出前病毒的平均拷贝数。计算平均拷贝数需要大量克隆进行Southern blotting，此方法耗时、费力。使用本制品不需要进行细胞的克隆即可简单地计算出前病毒的拷贝数。
与本制品组合使用的CycleavePCR Core Kit是采用Cycling探针法进行Real Time PCR反应的专用试剂盒，具有检出特异性高的优势，能够抑制背景基因组DNA的影响，从而简单、准确地对目的基因进行定量分析。 |
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| ■ 保存 |
| -20℃。 |
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| ■ 注意事项 |
1. 应先配制各种试剂的混合液，将dH2O、buffer 、酶等配制成Master Mix，可以减少试剂的损失及分装、混合的次数，使反应试剂体积更准确，防止实验结果之间产生误差。
2. 使用前将CycleavePCR Core Kit (Code No.: CY501) 中含有的TaKaRa Ex Taq HS和Tli RNase H II轻离心至Tube底部后再使用；由于酶保存液中含有50%的甘油，粘度高，分取时应慢慢吸取；酶类制品应在实验前从-20℃中取出，使用后立即放入-20℃保存。
3. CycleavePCR Core Kit (Code No.: CY501) 中含有的10×CycleavePCR Buffer在保存过程中有时会产生沉淀物，溶解后不影响使用。Vortex使其完全溶解后再使用。
4. 分装试剂时务必使用新的枪头 (Tip)，以防止样品间污染。 |
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