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In-Fusion方法通过设计引物将突变（碱基变化、删除、增加）引入。以环形质粒作为模板，通过反向PCR即可生成带有突变区域的线性载体。这个线性载体可以通过In-Fusion再进行环化。试剂盒已经附带了高效感受态细胞。
· 多用途：一个体系，可以进行替换、增加或删除最多12个碱基。
· 更少步骤：一个PCR反应即可；无需纯化或PCR产物的体外消化；无需连接。
· 方便性：试剂盒已附带高效感受态细胞。
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