引物 RNA提取 反转录试剂 引物 qpcr装置
 
 
■ 制品内容 (Code No.: RR092A: 20 μl反应×100次量)
  Code No. RR092S RR092A
1. 8X gDNA Eraser Premix*1 80 μl 200 μl
2. 5X RT Premix*2
160 μl 400 μl
3. RNase Free H2O 1 ml 1 ml×2
4. EASY Dilution II(for Real Time PCR)*3、4 1 ml 1 ml
 
*1:8X gDNA Eraser Premix成分是后续反转录反应所必需的,请务必进行基因组DNA的除去反应。含有RNase Inhibitor。
*2:含有dNTP mixture、Oligo dT Primer和Random 6 mers。
*3:制作标准曲线时梯度稀释total RNA和cDNA的稀释液。如果用水或TE Buffer稀释,往往不能准确地进行稀释,但使用EASY Dilution II (for Real Time PCR) 时,即使稀释至低浓度也能够进行准确地稀释。请注意,本制品不影响反转录和PCR反应,用其稀释后的样品可直接使用。
*4:可以单独购买EASY Dilution II (for Real Time PCR) (Code No. 9451)
 
■ 制品说明
PrimeScript FAST RT reagent Kit with gDNA Eraser是可以除去基因组DNA进行Real Time RT-PCR反应的专用反转录试剂。试剂盒中使用了具有较强DNA分解活性的gDNA Eraser,42℃,2 min即可除去基因组DNA,之后添加含有完全抑制DNA分解活性成分的反转录反应试剂,进行10分钟的反转录反应。由于基因组去除试剂和反转录反应试剂预先进行了预混化,因此,通过向RNA样品中依次添加试剂的简便操作,可以毫无损失地进行从基因组DNA去除到cDNA合成的反应。
本试剂盒尤其适用于存在基因组残留问题的Real Time RT-PCR分析,例如无法设计合适引物的单外显子基因或没有大内含子的基因,以及由于假基因的存在无法避免基因组来源的非特异性扩增时。
使用本制品合成的cDNA适用于嵌合荧光法和探针法qPCR分析。可以根据实验目的,选择与TB Green® Premix Ex Taq II FAST qPCR(Code No. CN830S/A)、TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR820Q/A/B)、TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420A/B)、Probe qPCR Mix (Code No. RR391S/A/B) 、Probe qPCR Mix, with UNG (Code No. RR392S/A/B)等定量PCR试剂组合使用。
 
■ 保存
-20℃。
 
■ 特长
1. 在短短15分钟内完成从去除基因组DNA到cDNA合成的反应。
2. 只需依次添加预混试剂的简便操作,即可进行反应。
3. 通过单管反应可以从模板RNA中毫无损失地合成cDNA。
4. Random 6 mers和Oligo dT Primer作为反转录引物,预先包含在5X RT Premix中,可以均匀地合成RNA的全部区域。
5. 本制品中附加了标准曲线制作用稀释液EASY Dilution II(for Real Time PCR),将Total RNA或cDNA稀释至低浓度时也能够进行准确稀释,容易在宽广范围内获得准确定量的标准曲线。
 
■ 使用注意
1.使用本制品合成的cDNA与TB Green关联制品组合使用时,建议使用以下TB Green Premix系列。
与本制品组合使用,可以得到可信度高的结果。
TB Green Premix Ex Taq II FAST qPCR(Code No. CN830S/A)
TB Green Premix Ex Taq II (Tli RNaseH Plus) (Code No.RR820Q/A/B)
TB Green Premix Ex Taq (Tli RNaseH Plus) (Code No. RR420Q/A/B)
本制品与TB Green Fast qPCR Mix (Code No. RR430S/A/B) 组合使用时,有时反应性能不好,不推荐使用。
2.8X gDNA Eraser Premix和5X RT Premix前在使用前需颠倒混匀,轻轻离心后使用。
3.分装试剂时务必使用新的枪头(Tip),以防止样品间污染。
 
定量PCR专用
快速反转录试剂
 
相关视频:
qPCR操作注意事项-混匀操作
 
 
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页面更新:2024-05-08 08:22:25

技术信息

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